低等动物包括无脊椎动物、微生物等作为生物制造平台，因其绿色、高效、高产、可持续等优点受到广泛关注和应用。低等动物糖基化图谱的构建是利用其作为生物反应器开发医用蛋白类药物的关键基础之一。

团队负责人朱菲菲副研究员2009年本科毕业于南京大学化学化工学院，2014年毕业于美国印第安纳大学，获分析化学博士学位，主攻蛋白质糖基化结构研究。2015年加入江苏大学生命科学学院，开展了模式动物糖生物学研究。以主持人身份先后获得国家自然科学基金青年项目“家蚕蛋白质糖基化在BmNPV入侵过程中的分子作用机制”和江苏省自然科学基金青年项目“家蚕蛋白质糖基化在抗质型多角体病毒（BmCPV）入侵过程中的机制研究”以及面上项目“家蚕脂质糖基化在BmNPV感染机制中的作用研究”等，掌握了低等动物糖基化相关的知识储备和关键技术，包括糖蛋白提取，富集纯化，糖链结构分析，以及糖基转移酶和糖苷酶的体外表达和结构表征等。为完善糖基化结构和功能研究平台，2019年访问了国际著名学者、无脊椎糖生物专家奥地利维也纳自然资源与生命科学大学Wilson教授（我校科技部高级外国专家人才）实验室并与之保持着友好稳定的合作关系。在领域内知名期刊已发表相关SCI论文20余篇，主要成果有：

1. 建立了凝集素富集/高分辨质谱鉴定复杂糖基化修饰结构的分析方法

由于糖链在复杂生物样本中存在丰度很小，一般先需进行富集和纯化等步骤获取。申请者在富集纯化糖链和糖蛋白方面具有丰富的理论和操作经验。申请者比较了不同凝集素对不同类型糖链的富集效率，为从复杂生物样品中获得特定类型的糖链提供了科学依据（Zhu, F., Clemmer, D. E., et al., Analyst 2017, 142: 65-74），并利用离子淌度质谱证实了蛋白质糖基化修饰的异质性和多元性（Zhu, F., Trinidad, J. C., et al., J. Am. Soc. Mass Spectrom. 2015, 26, 1092-1102）。此外，由于目前糖链数据库还不完善，很多糖链结构的鉴定仍然依赖手动解析MS/MS碎片图谱。申请者对使用高分辨质谱鉴定复杂结构糖链及其同分异构体有着丰富的经验，如鉴定复杂生物样本中蛋白质糖基化结构和利用特征碎片图谱区分糖链的同分异构体等（Zhu, F., Lee, S., et al., J. Am. Soc. Mass Spectrom. 2012, 23, 2158-2166；Sarbu, M., Zhu, F., et al., Rapid Commun. Mass Spectrom., 2015, 29, 1929-1937；Zhu, F., Glover, M. S., et al., J. Am. Soc. Mass Spectrom. 2015, 26, 25-35）。

  2. 初步建立了家蚕等无脊椎动物糖基化修饰结构的技术流程和实验平台    

申请人总结了目前报道的无脊椎动物糖基化结构和功能研究进展，为深入开展低等动物糖基化功能研究提供重要参考（Zhu, F., Li, D., et al., Open Biol. 2019, 9, 180232）。我们通过与奥地利自然资源与生命科学大学无脊椎动物糖生物学专家Iain Wilson教授实验室合作，建立了一整套对家蚕等无脊椎动物糖基化修饰富集、纯化和鉴定的实验室技术流程，包括离子交换色谱、分子筛、亲和色谱、质谱和外切糖苷酶验证等技术手段和方法，为杆状病毒表达系统及家蚕生物反应器的实际应用提供详尽可靠的糖基化修饰图谱（数据未发表）。

本成果拥有完全自主知识产权，预期能为低等动物糖基化的工程化改造等技术需求提供服务，创造客观社会效益。